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Produktdetails:
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| Produkt-Name: | DNA-Ligase | 10299ES40: | 40.000 U |
|---|---|---|---|
| 10299ES42: | 400.000 U | 10299ES83: | 1.600.000 U |
| Eingegebene DNA-Mole (pmol): | Eingegeben DNA (ng-)/[0,66 × gab DNA-Durchschnittslänge ein (BP)] | Anwendung: | für NUR Forschungsgebrauch! |
| Markieren: | 400 U/UL T4 DNA-Ligase,Forschung T4 DNA-Ligase,Ligase-biochemisches Reagens DNA-T4 |
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Schneller Ligase DNA-T4 (400 U/ΜL)
Schneller Ligase DNA-T4 ist ein einzelnes Enzympräparat, das benutzt werden kann, um DNA-Fragmente und Adapter bei NGS-Bibliotheksbau anzuschließen. Das Produkt ist durch den hohen der Reihe nach ordnenden Durchsatz überprüft worden und ausgezeichnete Qualität hat. Dieses Enzym hat eine in hohem Grade leistungsfähige Verbindungsfähigkeit, die für die Verbindung von komplexen Nukleinsäurefragmenten sehr passend ist, wie dem Ω-Adapter der MGI-Plattform. Es wird empfohlen, um Hieff NGSTM Ultima DNA-Bindungs-Modul (Cat#12604) vorzuwählen dessen Kernkomponente schneller Ligase DNA-T4 für Kunden ist, die nicht Systemanpassung benötigen.
| Produkt-Name | Cat# | Größe |
| Schneller Ligase DNA-T4 (400 U/ΜL) | 10299ES40 | 40.000 U |
| 10299ES42 | 400.000 U | |
| 10299ES83 |
1.600.000 U |
Produkt-Beschreibung über schnellen Ligase DNA-T4
Schneller Ligase DNA-T4 ist ein einzelnes Enzympräparat, das benutzt werden kann, um DNA-Fragmente und Adapter bei NGS-Bibliotheksbau anzuschließen. Das Produkt ist durch den hohen der Reihe nach ordnenden Durchsatz und ausgezeichnete Qualität überprüft worden hat. Dieses Enzym hat eine in hohem Grade leistungsfähige Verbindungsfähigkeit, die für die Verbindung von komplexen Nukleinsäurefragmenten sehr passend ist, wie dem Ω-Adapter der MGI-Plattform. Es wird empfohlen, um Hieff NGS vorzuwählenTMUltima DNA-Bindungs-Modul (Cat#12604) dessen Kernkomponente schneller Ligase DNA-T4 für Kunden ist, die nicht Systemanpassung benötigen.
Produkt-Komponenten schnellen Ligase DNA-T4
| Elementnummer | Komponenten | Cat#/Size | ||
| 10299ES40 | 10299ES42 | 10299ES83 | ||
| 10299-A | Schneller Ligase DNA-T4 (400 U/ΜL) | µL 100 | 1 ml | 4 ml |
| 10299-B | 10 × T4 DNA-Ligase-Puffer | μL 250 | 5 × 500 μL | 10 ml |
Anweisungen
1. Die gegenwärtigen Mainstream DNA-BibliotheksBausätze werden im Allgemeinen nicht nach Endenreparatur und Ein-Rückstandbehandlung gereinigt und direkt Adapterbindung durchführen. Beziehen Sie bitte sich die auf folgende Vorbereitung für das Reaktionssystem. Turbulenz gänzlich, spinnen kurz und für Minute 15 an 20°C. auszubrüten.
| Komponenten | Volumen (μL) |
| DA-angebundene DNA | 60 |
| 10 × T4 DNA-Ligase-Puffer | 10 |
| 50% KLAMMER 6000 | 10* |
| DNA-Adapter | X** |
| Schneller Ligase DNA-T4 (400 U/ΜL) | 15*** |
| ddH2O | Bis 100 |
[Anmerkung]: *50% KLAMMER 6000 wird nicht in der Ausrüstung, Sie muss sie durch selbst vorbereiten zur Verfügung gestellt.
** Beziehen Sie sich die auf folgende Tabelle für die Menge des Adapters.
*** Die Menge schnellen Ligase DNA-T4, der benutzt wird, kann addiertes μL 1-5 sein, wie benötigt.
2. Die Qualität und die Konzentration von den Adaptern, die direkt benutzt werden, beeinflussen Bindungs-Leistungsfähigkeit und Bibliotheksertrag. Zu viel Adapterverwendung produziert möglicherweise mehr Adapterdimer, während niedrigere Verwendung möglicherweise Bindungs-Leistungsfähigkeit und Bibliotheksertrag beeinflußt. Die folgende Tabelle listet die empfohlene Menge des Adapters verwendet in verschiedenen eingegebenen DNA-Situationen unter Verwendung dieser Ausrüstung auf.
| Eingegebene DNA |
Adapter: Eingegebene DNA (molares Verhältnis) |
Eingegebene DNA |
Adapter: Eingegebene DNA (molares Verhältnis) |
| 1 μg | 10:1 | 50 ng | 100:1 |
| 500 ng | 20:1 | 25 ng | 200:1 |
| 250 ng | 40:1 | 1 ng | 200:1 |
| 100 ng | 100:1 | Seite 500 | 400:1 |
[Anmerkung]: Eingegeben DNA Mole (pmol) ≈ eingab DNA) (ng/[0,66 × eingegebene DNA-Durchschnittslänge (BP)].
Schritt 1: Berechnen Sie die Anzahl von Molen von Input DNA. Formel: Eingegeben DNA Mole (pmol) ≈ eingab DNA (ng-)/[0,66 × eingegebene DNA-Durchschnittslänge (BP)]; Eingegebenes DNA-Mole (pmol) ÷ =100 (0.66×300) = 0,5 pmol;
Schritt 2: Entsprechend der oben genannten Tabelle berechnen Sie die Anzahl von den Molen des Adapters hinzugefügt.; Wenn die eingegebene DNA 100ng ist, das molare Verhältnis von Adaptern: Input DNA ist 100:1 und die Anzahl von Molen von Adapter added=100×0.5 pmol=50 pmol;
Schritt 3: Berechnen Sie das Adapterzusatzvolumen. Adapterkonzentration = 15 μmol/L (wenn Sie den Adapter andere Firma benutzen, müssen Sie seine Konzentration entsprechend seinen Anweisungen bestimmen); Das Volumen des Adapters hinzugefügt = Molen des Adapters fügte (pmol 50) ÷ Konzentration des Adapters hinzu (μL 15 μmol/L) = 3,34 (Anmerkung: 15 μmol/L = 15 pmol-/μl);
Zusammenfassend ist das Volumen, dem der Adapter hinzugefügt werden kann, μL 3,4. (Anmerkung: Das maximale Zusatzvolumen des Adapters übersteigt μL nicht 5).
Das Produkt wird mit Eisbeuteln versendet und kann an -20°C für zwei Jahre gespeichert werden.
Einheits-Definition
In einem 20 μL Bindungs-Reaktionssystem wenn μg 6 von λDNA-HinterⅢ an 16℃ für 30 Minuten reagiert wird, wurde die Menge des Enzyms erfordert, um mehr als 50% Bindung der DNA-Fragmente zu geben als eine Einheit (U) definiert.
Vorsichtsmaßnahmen
1. Ligase DNA-T4 ist für körperliche Denaturierung empfindlich. Beim Mischen, wandeln Sie leicht das Rohr um und rütteln Sie gut. Rütteln Sie nicht kräftig;
2. Enzyme sollten in einem Eiskasten oder auf einem Eisbad gespeichert werden, wenn sie benutzt werden, und sollten an -20°C sofort nach Gebrauch gespeichert werden;
3. Dieses Produkt ist für NUR Forschungsgebrauch!
4. Zu Ihrer Sicherheit und Gesundheit, bitte Abnutzungslaborkittel und Wegwerfhandschuhe für Operation.
Wenn Sie mehr Informationen über diesen schnellen Ligase DNA-T4 (400 U/ΜL) benötigen, treten Sie bitte mit uns in Verbindung, danke
Ansprechpartner: Ms. Kris Zhang
Telefon: 0086-0769-85914911
